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產(chǎn)品中心

當前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞原代細胞復蘇/凍存人真皮毛乳頭細胞
人真皮毛乳頭細胞

產(chǎn)品簡介

人真皮毛乳頭細胞分離自皮膚毛囊組織。毛囊是表皮細胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭,中心是一根毛發(fā),立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。

產(chǎn)品型號:復蘇/凍存
更新時間:2024-07-09
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:478
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人真皮毛乳頭細胞

產(chǎn)品名稱 :人真皮毛乳頭細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0712h

組織來源 :毛囊組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

真皮毛乳頭細胞分離自皮膚毛囊組織。毛囊是表皮細胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭,中心是一根毛發(fā),立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結(jié)構(gòu)比較復雜的器官附件組織。毛囊實際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成,除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭(毛乳頭)外,毛囊其余部分都是由表皮細胞分化而來。真皮毛乳頭細胞位于毛囊基底部,是一類成纖維細胞。在毛囊發(fā)育早期,真皮細胞向單層上皮細胞發(fā)出第一真皮信號,刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細胞向下方的真皮發(fā)出第一表皮信號,誘導其形成有成纖維細胞組成的凝集細胞團。在此過程中,毛母質(zhì)細胞逐漸包裹凝集細胞團,形成成熟的真皮毛乳頭細胞。作為毛囊中的重要細胞群,真皮毛乳頭細胞的分子機制和臨床應(yīng)用正在被逐漸認識和解析。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 :PLL(0. 1m g/ml)
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)B S、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :梭形、多角形
傳代特性 :可傳3代左右
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決

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